%0 Journal Article
%T 乙型肝炎相关肝病肝移植术后外周血单个核细胞和骨髓造血干/祖细胞乙型肝炎病毒X基因整合检测
%A 赖威
%A 卢实春
%J 华西医学
%P 351-354
%D 2011
%X 【】　目的　了解乙型肝炎病毒（HBV）X基因在HBV相关肝病肝移植受体术后外周单个核细胞（PBMC）和骨髓CD34+细胞内的整合情况及其对乙肝疫苗接种的影响。　方法　采集1999年6月-2005年11月25例HBV相关肝病肝移植受体的外周静脉血及其中23例的骨髓血，以密度梯度离心结合单克隆免疫磁珠分离法获取外周血单个核细胞及骨髓CD34+细胞后，提取细胞DNA。因HBVX基因的整合频率最高，设计HBVX基因的特异引物，进行HBV-Alu-PCR，终产物进行电泳并回收、连接载体、筛选扩增后测序，检测有无X基因整合。　结果　经PCR后电泳及测序分析，25例HBV相关肝病肝移植受体术后的PBMC内未检测出HBVX基因的整合，其中采集到骨髓标本的23例CD34+细胞中亦未检测到HBVX基因的整合。　结论　肝移植术后受体体内HBV微生态的剧烈改变，使HBV整合的基本条件丧失，在此情况下，外周免疫细胞及骨髓造血干/祖细胞不是发生HBV整合的适宜场所，乙肝疫苗接种效果与HBVX基因整合关系不明确。【Abstract】　Objective　ToinvestigatewhetherhepatitisBvirusHBVXgeneintegratesinperipheralbloodmononuclearcell(PBMC)andbonemarrowCD34+cellsfromHBVrelatedliverdiseaserecipientsafterlivertransplantation.　Methods　BetweenJune1999andNovember2005,PBMCwereobtainedfrom25HBVrelatedliverdiseaserecipientsafterlivertransplantationandbonemarrowCD34+cellsobtainedfrom23casesamongthem.ThecellularDNAwasextractedbyDNAisolationandpurificationkitfollowingthemanufacture’sinstructions.SpecificprimerstoHBVXgeneandtohumanAlurepeatswereusedtoamplifythevirusintegrationthrougha3-roundhemi-nestPCR.ThePCRfinalproductwasjudgedby1.2%agaroseelectrophoresis,ligatedtoTvector,proliferatedinE.coil5αandsequenced.　Results　Accordingtoagaroseelectrophoresisandsequencinganalysis,therewerenoHBVXgeneintegrationinPBMCandbonemarrowCD34+cellsfromHBVrelatedlivertransplantrecipientsaftersurgery.　Conclusions　BecauseoftheradicalchangeofHBVmicroecologicalenvironmentinHBVrelatedlivertransplantrecipientsafteroperation,thefundamentalconditionofHBVintegrationhasbeenlost,whichledPBMCandbonemarrowCD34+cellsnotsuittoHBVXgeneintegratetohumangenome.AndtheimpactofHBVXgeneintegrationonHBVvaccinationisstillundefined.
%K 肝移植
%K 单个核细胞
%K 造血干细胞
%K 乙肝病毒
%K 整合
%U http://www.hxyxqk.com.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201103010