%0 Journal Article
%T 微生物谷氨酰胺转胺酶的乳糖诱导表达与纯化
%A 何冬兰
%A 邵坤彦
%A 叶程
%A 黄俊
%A 尚敏邦
%J 中南民族大学学报(自然科学版)
%P 26-32
%D 2012
%X 对已构建的工程菌株pET22b-MTG/E.coli BL21(DE3)进行质粒酶切和PCR鉴定,优化诱导温度、时间、pH和乳糖浓度等反应条件,采用乳糖自诱导培养基培养重组菌.并将重组菌上清液经凝胶过滤,离子交换及镍柱亲和层析后,对谷氨酰胺转胺酶纯化和SDS-PAGE电泳分析.结果表明:谷氨酰胺转胺酶在28℃,添加乳糖为1.2g/L诱导18 h,pH为7.0,培养11.5 h时升温至50℃诱导1 h,再放至28℃培养,表达效果较好,超过IPTG诱导效果.纯化后酶活为7.5 U/mL,比活力为10.9 U/mg.
%K 谷氨酰胺转胺酶
%K 乳糖
%K 表达
%K 纯化
%U http://znzk.scuec.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120369&flag=1