%0 Journal Article
%T 弓形虫分泌蛋白ROP5的全基因原核重组表达与抗原性鉴定
%A 薛峰
%A 黄敏君
%A 洪彩玲
%A 杨英超
%A 甘绍伯
%A 谷俊朝
%J 中国热带医学
%P 259-263
%D 2014
%X 目的在大肠杆菌工程菌中重组表达刚地弓形虫RH株棒状体蛋白5(ROP5)的融合蛋白GST-6×His-ROP5，并初步评价重组蛋白的抗原性。方法体外细胞培养弓形虫速殖子，提取总RNA，反转录获得cDNA，PCR扩增ROP5基因全长，与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接，在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白，最后通过Westernblotting鉴定重组蛋白rROP5的抗原性。结果构建了弓形虫ROP5全基因重组表达质粒，诱导表达了GST-6×His-ROP5融合蛋白，分子量为96kDa，与预测结果相符，重组蛋白与人源抗血清有显著免疫印迹反应。结论本研究获得了弓形虫ROP5全长重组蛋白，为进一步改进弓形虫诊断抗原，研究蛋白结构以及分泌蛋白与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
%K 刚地弓形虫
%K 棒状体蛋白ROP5
%K 原核重组表达
%K 抗原性
%U http://www.cntropmed.com/CN/abstract/abstract740.shtml