%0 Journal Article
%T 弓形虫致密颗粒蛋白GRA7的全基因原核重组表达
%A 洪彩玲
%A 薛峰
%A 黄敏君
%A 甘绍伯
%A 谷俊朝
%J 中国热带医学
%P 1045-1048
%D 2013
%X 目的克隆弓形虫RH株致密颗粒蛋白7(GRA7)的全长基因,在大肠杆菌工程菌中重组表达GST-His-GRA7融合蛋白。方法提取弓形虫总RNA,反转录获得cDNA,PCR扩增GRA7基因全长,与pET-41Ek/LIC载体通过基因重组直接连接,在大肠杆菌RosettaTM(DE3)pLysS工程菌中诱导表达重组融合蛋白,最后采用SDS-PAGE和Westernblotting鉴定重组蛋白产物。结果构建了弓形虫GRA7全基因的重组表达质粒,诱导表达了GST-His-GRA7融合重组蛋白,分子量为62kD,与预测结果相符。结论研究获得了弓形虫GRA7全基因的重组蛋白,为进一步研究弓形虫GRA7抗原性及其与宿主细胞的相互作用奠定了基础。
%K 刚地弓形虫
%K 致密颗粒蛋白GRA7
%K 反转录基因克隆
%K 原核重组表达
%U http://www.cntropmed.com/CN/abstract/abstract996.shtml