%0 Journal Article %T 吉非替尼耐药人肺腺癌细胞的建立及耐药机制的研究 %A 宁兰兰 %A 马为 %A 刘俊 %A 王汉平 %A 李裕军 %J 中国热带医学 %P 1045-1049 %D 2014 %X 目的建立吉非替尼耐药的人肺腺癌细胞株A549/GR,并初步探讨其生物学特性及其耐药机制。方法采用逐步增加吉非替尼剂量法诱导人肺腺癌细胞A549形成吉非替尼耐药的细胞株A549/GR;CCK-8法检测细胞的半数抑制浓度(IC50)及绘制细胞生长曲线,并计算耐药指数;显微镜下观察吉非替尼作用前后A549、A549/GR细胞形态学的改变;直接测序法检测EGFR基因在酪氨酸激酶区的基因突变;qRT-PCR法检测EGFR基因在mRNA水平表达的改变。结果CCK-8法测得A549/GR细胞的耐药指数为6.00,显示成功建立了吉非替尼耐药的细胞模型,其倍增时间较亲代细胞缩短;形态学观察显示A549/GR细胞极性消失,有变长梭形的趋势;A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变;qRT-PCR法显示A549/GR细胞EGFR基因在mRNA水平较亲代细胞轻度上调。结论成功建立吉非替尼耐药人肺腺癌A549/GR细胞模型,A549/GR细胞耐药性的产生与EGFR基因18-21外显子区域突变无关。 %K 吉非替尼 %K 耐药性 %K 表皮生长因子受体 %K 非小细胞肺癌 %U http://www.cntropmed.com/CN/abstract/abstract239.shtml