%0 Journal Article
%T 重组大肠杆菌共表达D-海因酶和N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶
%A 胡晓佳
%A 李强
%A 丛进阳
%J 过程工程学报
%D 2006
%X 通过PCR分别扩增得到N-carbamoylase基因和上游带有RBS区的D-hydantoinase基因，并将其依次克隆入pBAD/HisA质粒中，得到呈多顺反子结构的双酶表达质粒pBAD-CRH，转化E.coliTop10F￠得到重组菌TaraCRH.实验证明，E.coliTaraCRH对外源蛋白的表达控制严紧，而加入阿拉伯糖诱导后可以成功表达两酶基因.诱导条件优化结果表明，诱导温度采用29℃，培养基中阿拉伯糖浓度0.05g/L可达到最高酶活.进一步尝试采用玉米浆培养基代替LB培养基，在经过优化的玉米浆培养基中培养TaraCRH菌株，经阿拉伯糖诱导，海因酶和水解酶酶活分别达到3.52和4.21U/mL.
%K D-海因酶
%K N-氨甲酰基-D-氨基酸酰胺水解酶
%K 多顺反子
%K 大肠杆菌
%K 共表达
%U http://www.jproeng.com/qikan/Cpaper/zhaiyao.asp?bsid=25