%0 Journal Article %T 电喷雾质谱法研究细胞色素Tb5及其F35Y突变体蛋白肽链和辅基的相互作用 %A 余 %A 中天 %A 郭寅龙 %A 王韵华 %A 姚萍 %A 黄仲贤 %A 张尊建 %A 相秉仁 %J 化学学报 %P 956-960 %D 2001 %X 本文通过牛肝线粒体细胞色素Tb5和它的F35Y突变体蛋白相对分子质量的外标法测定,得到细胞色素Tb5全蛋白的相对分子质量为10077.5脱辅基蛋白的相对分子质量为9461.4F35Y突变体蛋白的相对分子质量为10093.6,它的脱辅基蛋白的相对分子质量为9477.5,不同nozzle电压下的电喷雾质谱结果表明,该电压的大小明显影响蛋白肽链与血红素辅基之间的非共价结合,随着电压的降低,全蛋白谱峰的强度逐渐增大,然而,过低的电压导致了Na^+,K^+离子加合峰相对强度的增加,而不利于谱图分析。同时,考察到细胞色素Tb5在甲醇溶液和酸性溶液中的变性行为,因此选择nozzle电压70V,10%的甲醇水溶液和pH=7为得到全蛋白质谱峰的最佳条件。相同实验条件下得到的野生型CytTb5和F35Y突变体全蛋白的质谱峰相比较,其相对丰度有悬殊的差异,表明F35Y突变体蛋白的血红素结合能力明显低于野生型蛋白。通过解离出的Hemeb的分子离子峰进行解析,证明铁仍以三价离子存在于血红素辅基中。 %K 电喷雾 %K 质谱法 %K 细胞色素 %K 突变体 %K 蛋白质 %K 非共价结合 %K 血红素 %K 相互作用 %K 线粒体 %U http://sioc-journal.cn/CN/abstract/abstract334870.shtml