%0 Journal Article
%T 基于电喷雾电离质谱(ESI-MS)的丙酮稳定同位素标记对N-糖链的相对定量分析方法的研究
%A 薛向东
%A 孙玉姣
%A 刘洋
%A 张萍
%A 王仲孚
%A 黄琳娟
%J 化学学报
%P 220-226
%D 2014
%R 10.6023/A13101106
%X 建立了一种基于电喷雾电离质谱的丙酮稳定同位素标记对N-糖链进行相对定量的研究方法.与传统的PNGaseF酶水解N-糖链的方法不同，采用非特异性蛋白酶PronaseE对N-糖蛋白进行处理，使N-糖蛋白被酶解为带有一个氨基酸的糖氨酸（Glycan-Asn），为N-糖链引入了一个氨基活性基团，然后用丙酮对氨基进行标记.用d0/d6丙酮对RiboB标准糖蛋白的PronaseE酶解产物进行标记，考察了4对d0/d6丙酮标记的Glycan-Asn（Man5～Man8-Asn）在电喷雾电离质谱中的线性、动态范围以及重现性.结果表明，在10倍动态范围内，相对定量方法有良好的线性关系（R=0.9981）和重现性（CV<8.7%）.并将建立的方法应用于不同含量的鸡卵清白蛋白中，进一步验证了该方法的可行性.研究结果表明，该方法能准确分析样品中N-糖链的含量，对不同样品中N-糖链进行相对定量.该方法成本低廉，后处理方法简单方便，适于微量样品通量化分析，对差异糖组的研究有一定的意义.
%K 丙酮稳定同位素标记
%K 电喷雾电离质谱
%K 还原烷化
%K N-糖链的定量
%U http://sioc-journal.cn/CN/abstract/abstract343740.shtml