%0 Journal Article
%T 副溶血弧菌tdh基因在毕赤酵母中的表达及溶血活性检测
%A 赵永刚
%A 战文斌
%A 萨仁高娃
%A 王君玮
%A 王志亮
%J 海洋科学
%P 10-14
%D 2010
%X 通过PCR技术从副溶血弧菌(VibrioParahaemolyticus,VP)基因组DNA上扩增耐热溶血素基因tdh,双酶切后定向插入到酵母表达载体pPICZaA中,构建重组表达质粒pPICZaA-tdh,经限制性内切酶SacI线性化后电转化毕赤酵母(Pichiapastoris,P.pastoris)GS115,经PCR和测序鉴定耐热溶血素基因成功整合到毕赤酵母的基因组中。在甲醇诱导下进行tdh的表达,SDS-PAGE分析证明重组TDH(thermostabledirecthemolysin,TDH)的分子质量约为23ku,经Westernblotting鉴定VP抗体能与表达的TDH发生特异反应,说明tdh基因在毕赤酵母中的表达是准确的。溶血实验证明了表达的TDH具有溶血活性。本研究首次应用毕赤酵母表达耐热溶血素基因tdh,在培养基中获得分泌表达的耐热溶血素,为研究tdh基因的功能奠定了基础。
%K 耐热溶血素
%K 分泌表达
%K 毕赤酵母
%K 溶血活性
%U http://www.marinejournal.cn/hykx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100903&flag=1