%0 Journal Article
%T 一种适用于RT-PCR的微藻总RNA提取方法
%A 杨婧
%A 牛艳
%A 张可炜
%A 孔健
%J 海洋科学
%P 6-10
%D 2010
%X 以绿色巴夫藻(Pavlovaviridis)为实验材料，在比较了Trizol试剂法和异硫氰酸胍一步法这两种常用RNA提取方法的基础上，建立了一种十六烷基三乙基溴化铵(CTAB)和酸酚相结合的改良的CTAB-酸酚法。此方法利用高浓度的β巯基乙醇来防止RNA提取过程中多酚的氧化，然后利用CTAB并结合乙醇和醋酸钾同时使用的方法来有效去除多糖类物质对RNA的干扰。经琼脂糖凝胶电泳检测，所提取的总RNA的28S、18S条带清晰明亮，无降解；其A260nm/A280nm值为1.968；200～300nm全波长紫外扫描无多糖和蛋白吸收峰，表明提取的总RNA质量较好。对提取的总RNA直接进行反转录聚合酶链式反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction，RT-RCR)，能够清楚地获得目的基因的cDNA片段，进一步证实了改良的CTAB-酸酚法是一种高质量提取微藻总RNA的有效方法。
%K 绿色巴夫藻(Pavlova
%K viridis)
%K 多糖
%K 多酚
%K 总RNA
%K 反转录聚合酶链式反应
%U http://www.marinejournal.cn/hykx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100102&flag=1