%0 Journal Article %T 刺激隐核虫ADP/ATP 载体蛋白基因的克隆和分子特征分析 %A 刘程 %A 倪炜 %A 郭果为 %A 原丽平 %A 陈金铃 %A 徐阳 %A 叶忠锋 %A 王正朝 %A 黄晓红 %J 海洋科学 %P 44-51 %D 2014 %R 10.11759/hykx20120629002 %X 刺激隐核虫(Cryptocaryonirritans)是严重危害海水鱼类的寄生纤毛虫,为了对其进行分子水平的研究,采用SMART技术构建了刺激隐核虫滋养体期的cDNA文库,并随机挑取克隆做EST测序,获得大量克隆的基因。从中挑选ATP/ADP载体蛋白基因同源物(CiAAC)的克隆进一步测序获得全长的cDNA序列。该序列全长为1029bp,包含编码287个氨基酸的开放阅读框。用RT-PCR分析了其在刺激隐核虫各时期的表达情况,并应用生物信息学分析方法,对CiAAC基因进行不同物种的系统进化树分析、功能区分析、物理性质分析、疏水性分析、跨膜结构域预测、亚细胞定位、二级结构预测等等。结果表明:CiAAC蛋白在刺激隐核虫各时期均有表达;据预测,它为六次跨膜蛋白,与卵形肠虫(Nyctotherusovalis)的ADP/ATP载体蛋白的同源性最高,相似性达65%;蛋白为疏水性,并定位于刺激隐核虫的细胞质中。随后实验中通过对基因的定点诱变,将纤毛虫的非通用密码进行改造后,构建了pGEX-4T-1/CiAAC表达载体。以上实验为病原生物刺激隐核虫CiAAC载体蛋白的研究及应用提供了基础资料。 %K 刺激隐核虫( %K Cryptocaryon %K irritans) %K ATP/ADP %K 载体蛋白 %K 分子特征 %U http://www.marinejournal.cn/hykx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140108&flag=1