%0 Journal Article
%T 细角螺微卫星DNA 富集文库构建及特征分析
%A 李清荟
%A 陈晓姣
%A 黎中宝
%A 曹媛钰
%A 陈丽娜
%A 戴刚
%J 海洋科学
%P 1-5
%D 2013
%X 采用生物素磁珠富集法,用生物素标记的(GT)15和(CT)15两种探针与细角螺基因组MseI酶切的300～1200bp片段杂交,杂交复合物与链霉亲和素磁珠结合,捕获含有重复序列的微卫星片段。最后将磁珠捕获到的重复序列与PMD19-T载体连接后克隆到DH5α中构建微卫星基因组文库。通过PCR检测出354个阳性克隆,从中随机选取248个片段大于500bp的阳性克隆进行测序,结果显示,在220个成功测序的阳性克隆中共获得278个微卫星序列,其中完美型171个,占61.5%;非完美型81个,占29.1%;复合型26个,占9.4%。除探针使用的GT和CT的重复序列外,还筛选到三碱基GTT、TGG、GAA、CAA;四碱基TCTA、ACAG、TAGA、GTGA、GTCT、GATA及五碱基TTTTG的重复序列。在278条序列中共有82条可以设计引物。
%K 细角螺(Hemifusus
%K ternatanus)
%K 磁珠富集
%K 微卫星
%K 构建
%K DNA
%K 文库
%U http://www.marinejournal.cn/hykx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20130401&flag=1