%0 Journal Article %T 原位杂交技术在斜带石斑鱼神经坏死病毒检测中的应用 %A 陈晓艳 %A 何建国 %J 海洋科学 %P 1-4 %D 2008 %X 根据斜带石斑鱼(Epinepheluscoioids)神经坏死病毒(orange-spottednervousnecrosisvirus,OGNNV)的主衣壳蛋白(majorcapsidprotein,MCP)基因的保守序列,设计一对引物,从感染OGNNV的斜带石斑鱼组织匀浆液提取RNA为模板进行RT-PCR扩增,得到426bp的cDNA片断。用得到的RT-PCR产物加上地高辛(DIG)标记作为核酸探针。通过注射病毒提取液人工感染一组斜带石斑鱼,解剖感染病毒的斜带石斑鱼,从中分离出脑和眼睛,运用原位杂交技术检测组织中的OGNNV。实验表明,原位杂交具有较高的灵敏性和特异性,可以用原位杂交的办法来检测养殖的石斑鱼是否有携带该病毒,达到监控和预防神经坏死病爆发的目的。本实验还采用了H&E染色方法检测了感染NNV的石斑鱼脑部和眼部组织,观察细胞内的坏死部分。与原位杂交做对比,提高了检测的可靠性和准确性。本实验建立的石斑鱼神经坏死病毒的ISH检测方法有着较高的特异性和敏感性,易于操作,有助于石斑鱼神经坏死病毒的组织定位、发病机理的研究。 %K 神经坏死病毒 %K 地高辛 %K 原位杂交 %U http://www.marinejournal.cn/hykx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20080601&flag=1