%0 Journal Article
%T 大珠母贝微卫星DNA标记的分离与筛选
%A 柳明
%A 喻达辉
%A 黄桂菊
%J 海洋科学
%P 1-5
%D 2010
%X 采用生物素标记的(CA)15探针和磁珠富集法构建了大珠母贝(Pinctadamaxima)微卫星DNA文库,随机挑选1200个菌落,经PCR筛选得到298个候选克隆,成功测序246个,分析获得251个微卫星序列,其中完美型、非完美型和混合型分别占63%、32%和5%。除探针中使用的CA重复外,还得到AT、GT、TC、AG、GC、TAA、CAA、AGG、GATA、GACA、GTGC、CGTC、GACG、CTGT等重复序列。设计引物90对,挑选其中30对合成并筛选出21对能在大珠母贝基因组有效扩增的引物。种群PCR扩增后利用变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行检测,获得了10个多态位点,共检测出59个等位基因,片段长度范围为133～444bp。各位点等位基因数2～8个,平均等位基因数5.9个;有效等位基因数为1.3423～6.0000,平均为4.1240;多态性信息含量(CPI)为0.2225～0.8118,平均0.7179;期望杂合度(He)为0.2593～0.8475,平均0.7179;观测杂合度(Ho)为0.3000～0.8000,平均0.5333。这些微卫星多态性标记的获得,为进一步开展大珠母贝遗传育种、保护生物学和种群遗传多样性等研究奠定了一定基础。
%K 大珠母贝(Pinctada
%K maxima)
%K 磁珠富集法
%K 微卫星
%K 遗传多样性
%U http://www.marinejournal.cn/hykx/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100801&flag=1