%0 Journal Article
%T 水中抑制物对定量PCR与膜过滤法检测E.coli的影响
%A 徐丽梅
%A 王晓昌
%A 周进宏
%A 吉铮
%A 张崇淼
%J 环境工程学报
%D 2015
%X 针对水中病原微生物的污染,选择大肠埃希氏菌E.coli作为病原示踪剂,以E.coli染色体上β-葡萄糖醛酸酶uidA目的基因建立了SYBRGreen实时荧光定量PCR的检测方法。该定量PCR方法灵敏度高,检测限可达104CFU/L,线性关系良好,相关系数为R2=0.999。研究表明,定量PCR与菌液浓度呈显著正相关R2=0.935。通过人工投加腐殖酸、COD,研究了水中抑制物对定量PCR和膜过滤MF培养法的影响。结果显示,腐殖酸可使E.coli在培养皿上的菌落变小聚集,且显色不明显,当腐殖酸量为20mg/L时,浓度为50CFU/100mL的E.coli完全受到抑制,没有菌落出现。腐殖酸对PCR扩增的抑制作用明显,当腐殖酸浓度增加到10mg/L,定量PCR检测结果基因拷贝数减少约1log,增加到20mg/L定性PCR检测结果为阴性。
%K E.
%K coli
%K 实时荧光定量PCR
%K 膜过滤
%K 腐殖酸
%K 抑制作用
%U http://www.cjee.ac.cn/teepc_cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20150217&flag=1