%0 Journal Article %T 富士苹果中膜结合态多酚氧化酶分离纯化方法 %A 倪元颖 %A 刘芳 %A 温馨 %A 甘芝霖 %A 赵金红 %J 农业机械学报 %D 2015 %X 以烟台红富士为原料,研究膜结合态多酚氧化酶(mPPO)的分离纯化条件,采用非离子型去污剂结合热诱导方法粗提,硫酸铵分级沉淀,DEAE Sepharose Fast Flow离子交换柱层析方法对mPPO进行纯化,并对其进行串联质谱(LC—MS/MS)分析鉴定。结果表明mPPO提取纯化最佳条件为:超声提取10min,50%~80%饱和度硫酸铵沉淀,0.1mol/L NaCl 梯度洗脱。纯化后的mPPO纯度提高了64.30倍,比活力高达387032.97U/mg。纯化后的mPPO经SDS—PAGE和Native—PAGE分析均为单一蛋白带,且为亚基分子量67kDa的二聚体。经串联质谱分析及蛋白数据库鉴定此纯化蛋白为多酚氧化酶 %K 富士苹果 多酚氧化酶 分离纯化 膜结合态 离子交换柱层析 串联质谱 %U http://www.j-csam.org/jcsam/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20150229&flag=1