%0 Journal Article %T F3重组毒素的克隆表达及纯化 %A 朱海兵 %A 曾昭淳 %A 黄轶 %J 科技导报 %P 19-22 %D 2009 %X 以pEKH-F3质粒为模板,PCR扩增F3片段,将F3插入克隆质粒PQE80L,转化大肠杆菌,筛选,获得含有F3的PQE80L重组载体的克隆。提取绿脓杆菌菌株染色体DNA为模板,PCR扩增绿脓杆菌外毒素A催化区,PE40。然后将PQE80-F3和PE40重组,得到表达PQE80L-F3-PE40载体。转化至大肠杆菌DH5a,BL21,表达融合蛋白F3-PE40。结果显示,大肠杆菌表达了融合蛋白F3-PE40,表达的融合蛋白量大概占菌体总体蛋白量的20%。通过质粒提取、PCR扩增构建F3-PE40表达载体转化大肠杆菌,成功地表达了融合蛋白F3-PE40,为大规模表达、纯化F3-PE40的进一步功能奠定了基础。 %K 融合基因 %K 克隆 %K 表达 %K 绿脓杆菌外毒素A催化区 %U http://www.kjdb.org/CN/abstract/abstract31.shtml