%0 Journal Article
%T 猪γ干扰素的基因克隆、改造、表达及活性测定
%A 曹瑞兵
%A 周斌
%A 陈德胜
%A 陈溥言
%J 南京农业大学学报
%P 71-75
%D 2003
%R 10.7685/j.issn.1000-2030.2003.02.017
%X 提取经ConA诱导培养的猪外周血白细胞总RNA,RT-PCR扩增出猪IFN-γ基因并克隆到pGEM-T-easy载体,测序结果表明扩增片段是含有信号肽的猪IFN-γ的完整基因。设计1对引物亚克隆猪IFN-γ成熟蛋白基因并对其5′端前2个稀有密码子进行大肠杆菌偏嗜性改造。经测序鉴定后插入原核表达载体pRLC,并实现在大肠杆菌中的高效表达。表达产物以包涵体形式存在,经7mol？L-1盐酸胍的变性液溶解及05mol？L-1盐酸胍复性液复性处理,表达产物进行脱盐、凝胶层析纯化。细胞病变抑制法测定结果表明,重组猪IFN-γ具有较高的干扰素活性,约为45×106U？mg-1。
%K 猪γ干扰素
%K 基因改造
%K 原核表达
%K 分离纯化
%U http://nauxb.njau.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200302017