%0 Journal Article
%T 砂梨ACC合酶cDNA全长克隆及其反义与正义表达载体构建
%A 乔玉山
%A 宋长年
%A 王新卫
%A 李志强
%A 熊爱生
%A 姚泉洪
%A 章镇
%J 南京农业大学学报
%P 25-31
%D 2008
%R 10.7685/j.issn.1000-2030.2008.04.005
%X 为构建干扰砂梨(PyruspyrifoliaNakai)ACC合酶基因表达的遗传转化载体,利用RACE技术从’早生新水’成熟果实cDNA中克隆了ACC合酶的cDNA,该cDNA全长为1939bp,命名为Pyp-ACS,GenBank登录号为EF566865。Pyp-ACS核苷酸序列含有5′末端非翻译区109bp、1488bp完整的开放阅读框和3′末端非翻译区342bp(含25bp的Ploy+(A))。Pyp-ACS编码495个氨基酸,与白梨(Pyrus×bretschneideriRehd.)、西洋梨(PyruscommunisL.)、中国李(PrunussalicinaLindl.)、桃(Prunuspersica(L.)Batsch)、梅(PrunusmumeSeib.etZucc.)、苹果(Malus×domesticaBorkh.)和柿(DiospyroskakiThunb.)有较高的同源性。该氨基酸序列具备ACC合酶7个保守区和组成该酶活性中心的12个氨基酸残基,即SLSKDMGFPGLR,进一步验证了克隆的正确性。以pYPX145载体为基础,分别将Pyp-ACS编码区序列反向和正向插入相应位点构建反义和正义表达载体,并分别命名为pPyp-ACS(-)和pPyp-ACS(+),目的基因由双35S启动子所控制。分别将这2个表达载体导入根癌农杆菌菌株(Agrobacteriumtumefaciens)EHA105,为耐贮藏转基因梨的遗传转化提供载体。
%K 砂梨
%K ACC合酶
%K cDNA
%K 反义/正义表达载体
%U http://nauxb.njau.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200804005