%0 Journal Article
%T 菊花B病毒外壳蛋白互作蛋白的筛选
%A 楼望淮
%A 蒋甲福
%A 陈素梅
%A 房伟民
%A 陈发棣
%A 管志勇
%A 廖园
%J 南京农业大学学报
%P 43-48
%D 2013
%R 10.7685/j.issn.1000-2030.2013.04.008
%X 采用PCR扩增菊花B病毒(CVB)外壳蛋白基因的开放阅读框,构建酵母双杂交系统所需的诱饵表达载体pGBKT7-CVBCP,测序验证后转化Y2HGold酵母菌。将酵母菌Y187/pGADT7-cDNA与酵母菌Y2HGold/pGBKT7-CVBCP进行交配转化,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade/X-α-Gal平板上筛选蓝色阳性克隆并测序pGADT7-cDNA的插入片段。结果表明诱饵载体表达产物对酵母无毒性作用,且对报告基因无自激活作用。筛选菊花cDNA文库初步得到了与CVB外壳蛋白相互作用的E3泛素连接酶ARIADNE-like蛋白和ATP结合蛋白,为进一步研究CVB外壳蛋白与寄主的互作机制奠定了基础。
%K 菊花
%K 菊花B病毒
%K 外壳蛋白
%K E3泛素连接酶
%K 酵母双杂交
%U http://nauxb.njau.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201304008