%0 Journal Article
%T 禾谷镰饱菌β-微管蛋白基因的克隆及在原核细胞中的表达
%A 张聪
%A 徐建强
%A 于俊杰
%A 陈长军
%A 王建新
%A 周明国
%J 南京农业大学学报
%P 51-56
%D 2011
%R 10.7685/j.issn.1000-2030.2011.01.009
%X 分别扩增了禾谷镰孢菌(Fusariumgraminearum)对多菌灵(MBC)敏感菌株(MBCS)的β1-微管蛋白基因(β1-S)和β2-微管蛋白基因(β2-S),及多菌灵中抗菌株(MBCMR)和高抗菌株(MBCHR)的β2-微管蛋白基因(β2-MR和β2-HR),测序正确后连接到pET32a(+)原核表达载体上,转化至大肠杆菌Rosepta感受态中,经IPTG(1mmol.L-1)诱导,得到了N末端融合6×His纯化标签的表达产物。SDS-PAGE电泳分析表明在大肠杆菌中表达了相对分子质量约68×103的蛋白,和预测蛋白大小一致,表达的产物主要以包涵体的形式存在。表达的蛋白经HisTrapTMHPColumns纯化并做了Western-blot验证,结果表明,该蛋白能与抗His标签的单抗发生特异性反应。
%K 禾谷镰孢菌
%K β-微管蛋白基因
%K 原核表达
%K 纯化
%K Western-blot
%U http://nauxb.njau.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201101009