%0 Journal Article
%T 实时荧光定量PCR检测猪源Mx1方法的建立及应用
%A 张小敏
%A 周斌
%A 何丹妮
%A 庞然
%A 赵津
%A 陈溥言
%J 南京农业大学学报
%P 92-96
%D 2013
%R 10.7685/j.issn.1000-2030.2013.01.016
%X 根据GenBank中的猪源抗病毒蛋白Mx1基因(poMx1)序列设计1对特异性引物,从Mx1基因全长片段中扩增和克隆了特异性的115bp核苷酸片段。测序鉴定正确后将重组质粒进行定量并10倍倍比稀释作为扩增模板,通过SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法,建立Mx1的标准曲线及回归方程。结果显示该标准曲线的回归方程为Y=-2.9863lgX+38.2393(R2=0.9985),灵敏度为1×102μL-1;应用该方法对猪瘟兔化弱毒苗接种猪肾细胞(PK-15)后产生的poMx1mRNA进行定量分析,发现病毒感染细胞4h后,poMx1的表达量最高(P<0.01),然后随着时间的增加而缓慢减少。结论建立的SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR方法可以检测poMx1mRNA的表达水平。
%K 猪源Mx1
%K 实时荧光定量PCR
%K 标准曲线
%U http://nauxb.njau.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201301016