%0 Journal Article %T 偃麦草SRAP-PCR反应体系优化 %A 毛伟 %A 李培英 %A 孙宗玖 %J 北方园艺 %P 91-97 %D 2015 %R 10.11937/bfyy.201502026 %X 以偃麦草叶片DNA为模板,利用单因子和L16(45)正交实验设计对影响偃麦草SRAP-PCR反应效果的Mg2+、引物、dNTPs、DNA、TaqDNA聚合酶5种因素进行优化,并比较了不同退火温度对扩增反应的影响,通过综合比较分析建立偃麦草SRAP-PCR的优化反应体系。结果表明优化的偃麦草SRAP-PCR总体系20μL中,Mg2+1.75mmol/L,引物0.15μmol/L,dNTPs0.20mmol/L,DNA50ng,TaqDNA聚合酶0.75U,2μL10×PCRbuffer;Mg2+和引物浓度对扩增效果影响最大,DNA浓度影响最小;采用该体系对32份偃麦草进行验证,扩增结果清晰稳定,此体系的建立为利用SRAP分子标记进行偃麦草遗传多样性、抗性标记等研究奠定了技术基础 %K 偃麦草 %K SRAP %K 体系优化 %U http://bfyy.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201502026