%0 Journal Article %T 菊花SSR-PCR反应体系的建立和优化 %A 李亚慧 %A 黄丛林 %A 董然 %J 北方园艺 %P 127-131 %D 2012 %X 为快速确定菊花SSR反应体系,利用正交实验设计L?16(45)对菊花基因组SSR-PCR反应体系的5个因素(模板DNA、Mg2+、dNTP、引物和Taq酶)在4个水平上进行正交设计,筛选出适合菊花的最佳SSR-PCR反应体系,进一步利用单因素完全随机试验筛选各反应因素的最佳水平。结果表明建立菊花基因组DNASSR-PCR反应体系为25μL60ng模板DNA、2.0mmol/LMg2+、0.1mmol/LdNTP、0.3μmol/L引物、1UTaq酶。并对菊花引物进行梯度退火试验,其最佳退火温度在53.1℃;扩增程序是95℃预变性5min;32个循环的94℃变性50s、53.1℃退火50s、72℃延伸50s;72℃延伸8min,4℃保存。该体系的建立为今后菊花SSR分析奠定了基础。 %K 菊花 %K SSR标记 %K 正交设计 %K 反应体系优化 %U http://bfyy.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=2012013047