%0 Journal Article %T 毛?ISSR-PCR反应体系的建立 %A 李娜 %A 张存旭 %A 刘伟 %A 宋利伟 %A 王豪 %A 杨玲 %J 北方园艺 %P 114-119 %D 2013 %X 以毛?叶片为试材,通过单因素2次循环试验对毛?ISSR反应体系进行优化,建立了毛?ISSR-PCR的最佳反应体系和扩增程序。结果表明PCR反应体系总体积为25μL,其中10×Buffer2.5μL,模板DNA用量50ng,TaqDNA聚合酶用量1.5U,Mg2+浓度2.0mmol/L,引物浓度0.6μmol/L,dNTPs浓度0.15mmol/L;扩增程序94℃预变性5min;94℃变性50s,48.8~?59.1℃退火60s,72℃延伸1.5min,38个循环;最后72℃延伸10min。在此基础上,从100条ISSR通用引物中筛选出17条多态性好、稳定性高的引物,并优化了它们的退火温度。这一优化体系的建立,为开展毛?种质资源鉴定、遗传多样性及分子育种方面的研究提供了技术依据和参考。 %K 毛? %K ISSR %K 单因素2次循环试验 %K 体系优化 %K 引物筛选 %U http://bfyy.haasep.cn/oa/DArticle.aspx?type=view&id=201322035