%0 Journal Article %T 星海链霉菌卤化酶重组蛋白在大肠杆菌中可溶表达 %A 王玉梅 %A 赵心清 %A 马昱澍 %A 魏东芝 %J 大连理工大学学报 %P 278-284 %D 2014 %R 10.7511/dllgxb201403003 %X 大肠杆菌(Escherichiacoli,E.coli)是表达异源蛋白的良好宿主,但常遇到蛋白表达产物不可溶的困难.在对来自星海链霉菌的卤化酶基因sinH进行大肠杆菌异源表达时,为克服蛋白表达产物可溶性低的问题,探讨了不同载体对蛋白可溶表达的影响.利用pET28a进行SinH表达时不能得到可溶的目标蛋白;使用含有泛素标签及内含肽的载体pHUIE实现了卤化酶蛋白SinH的可溶表达,但纯化后纯度不高;利用带有链霉菌分子伴侣蛋白基因的载体pET28a-SinH与pETcoco-pL1SL2在E.coliBL21(DE3)中共表达,在30℃,0.1mmol/LIPTG诱导条件下表达4h,成功获得大量可溶蛋白,使用亲和层析(Ni-NTA)纯化,获得了较纯的目标蛋白SinH,上述研究结果为在大肠杆菌中进行其他链霉菌蛋白的可溶表达提供了参考. %K 卤化酶 %K 星海链霉菌 %K 可溶表达 %K 泛素标签 %K 链霉菌分子伴侣 %K 共表达体系 %K 蛋白纯化 %U http://press.dlut.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140303&flag=1