%0 Journal Article
%T 全血改进线性指数聚合酶链式反应用于焦磷酸测序检测基因多态性
%A 项铮
%A 刘云龙
%A 邢晓清
%A 初亚男
%A 宋沁馨
%A 周国华
%J 分析化学
%P 55-62
%D 2015
%R 10.11895/j.issn.0253-3820.140395
%X 焦磷酸测序是目前基因多态性检测的主要方法之一,但是其前期的样本制备工作较为繁琐,限制了其在临床检测中的应用.为了简化焦磷酸测序的流程,本研究根据不对称PCR原理,改进了线性指数聚合酶链式反应(LATE-PCR)的引物设计方法,增加过量引物的长度和浓度,并结合全血直接扩增技术,建立了基于普通rTaq聚合酶和高pH缓冲液(HpHBuffer)的全血改进LATE-PCR(ImprovedLATE-PCR,imLATE-PCR)方法.考察了方法的最优扩增体系、血液抗凝剂对其影响以及全血模板量.采用单管、一步法直接扩增出单链测序模板,成功地对24例临床血样的乙醇脱氢酶基因多态性进行了检测,检测结果可用于指导临床个体化用药.24例样本的基因型分别为ADH1B位点AA纯合6例、AG杂合14例、GG纯合4例;ADH1C位点GG纯合20例、AG杂合4例、AA纯合0例.
%K 全血直接扩增
%K 线性指数聚合酶链式反应
%K 焦磷酸测序
%K 基因多态性
%K 酒精代谢
%U http://210.14.121.5:8080/fxhx/CN/abstract/abstract13764.htm