%0 Journal Article %T 时间分辨荧光免疫法检测日本鳗鲡的产酸克雷伯氏菌 %A 卢洁 %A 郭松林 %A 冯建军 %A 王艺磊 %A 朱洪泉 %A 林鹏 %J 分析化学 %P 1709-1714 %D 2012 %R 10.3724/SP.J.1096.2012.20139 %X 从皮肤点状出血的日本鳗鲡中分离出产酸克雷伯氏菌菌株B12,经福尔马林灭活后,注射新西兰兔,制备免疫抗血清,G蛋白亲和层析纯化得到抗体(IgG),以固定于微孔板的IgG作为捕获抗体,Eu3+螯合物标记的IgG作为检测抗体,建立了产酸克雷伯氏菌的夹心型时间分辨荧光免疫检测法(TRFIA),并研究了抗体浓度、免疫时间及离解时间对检测的影响。本方法检出限为5.0×103cfu/mL;线性范围5.0×103-1.0×107cfu/mL,相关系数达0.99以上。交叉反应表明其具有较高的特异性,板内和板间相对标准偏差分别为5.64%和2.27%。将本方法标准化后,检测了29份人工感染的日本鳗鲡样品,包括鳃、肾、肠、肝和肌肉组织,结果满意。 %K 时间分辨荧光免疫检测 %K 产酸克雷伯氏菌 %K 日本鳗鲡 %U http://210.14.121.5:8080/fxhx/CN/abstract/abstract7490.htm