%0 Journal Article
%T 呋喃唑酮代谢物单克隆抗体制备及酶联免疫吸附分析方法
%A 任海涛
%A 沈玉栋
%A 徐振林
%A 杨金易
%A 雷红涛
%A 肖治理
%A 王弘
%A 孙远明
%J 分析化学
%P 745-751
%D 2012
%R 10.3724/SP.J.1096.2012.10409
%X 本研究针对呋喃唑酮代谢物(AOZ),设计合成了系列半抗原,进一步通过偶联牛血清白蛋白(BSA)免疫Balb/c小鼠、细胞融合、筛选和亚克隆等过程成功获得了源于新颖半抗原H3的具有高亲和力(亲和力常数6.68×1010L/mol)和高特异性(与其它功能类似物交叉反应小于0.1%)抗AOZ单克隆抗体。同时,基于设计合成的系列同/异源半抗原/包被抗原,考察了不同结构包被原对ELISA方法灵敏度的影响。另外,采用最佳的特征结构异源包被原H5-OVA,建立了以对硝基苯甲醛(p-NP)为衍生剂的AOZ间接竞争ELISA(icELISA)和直接竞争ELISA(dcELISA)检测方法。结果表明:icELISA模式的AOZ检测IC50为0.503μg/L,定量检测线性范围(IC20~IC80)为0.06~14.0μg/L,检出限(IC10)达0.017μg/L;dcELISA模式的AOZ检测IC50为1.19μg/L,定量检测线性范围为0.14~23.6μg/L,检出限为0.056μg/L。两种方法对AOZ的检测灵敏度和定量线性范围均达到相关检测限量要求,可满足不同需求的实际样品检测。
%K 呋喃唑酮
%K 单克隆抗体
%K 酶联免疫法
%K 异源包被
%U http://210.14.121.5:8080/fxhx/CN/abstract/abstract133.htm