%0 Journal Article
%T 米根霉胞内氨基酸的高效液相色谱测定及其代谢途径分析
%A 史纯珍
%A 张红漫
%A 黄和
%A 李霜
%A 宋萍
%A 何四龙
%J 分析化学
%P 574-578
%D 2012
%R 10.3724/SP.J.1096.2012.11048
%X 建立了米根霉胞内代谢物提取方法定量评价体系,用100%甲醇作为提取剂获得对米根霉胞内能荷物质最佳的提取效果。用HPLC法建立了米根霉产富马酸体系胞内18种氨基酸的含量测定方法。采用异硫氰酸苯酯(PITC)作为柱前衍生化试剂,所有氨基酸在28min内洗脱完毕。以SepaxAA柱(250mm×4.6mm,5μm)为分析柱,流速1.0mL/min,检测波长254nm,以0.1mol/L醋酸钠(pH6.5)-乙腈(93∶7,V/V)为流动相A,乙腈-水(80∶20,V/V)为流动相B,梯度洗脱。18种氨基酸在1.87~45.3mg/L范围内线性关系良好,相关系数大于0.991;加标回收率在96.3%~102.7%之间;相对标准偏差在1.6%~2.9%之间。运用本方法测定不同发酵时间米根霉胞内氨基酸的含量,得到其在发酵过程中的变化趋势,并结合氨基酸代谢途径分析了该发酵条件下富马酸产量偏低的原因。
%K 高效液相色谱法
%K 柱前衍生化
%K 氨基酸
%K 米根霉
%U http://210.14.121.5:8080/fxhx/CN/abstract/abstract102.htm