%0 Journal Article
%T 基于克隆测序技术的人类白细胞抗原基因高分辨率分型方法的建立
%A 邢晓清
%A 初亚男
%A 项铮
%A 宋沁馨
%A 周国华
%J 分析化学
%P 1574-1579
%D 2014
%R 10.11895/j.issn.0253-3820.140494
%X 运用优化的扩增和克隆测序技术,建立了人类白细胞抗原(HLA-B)基因的高分辨率分型方法.针对HLA-B基因保守区序列设计引物进行等位基因扩增,基于质粒不相容原理将杂合型等位基因有效克隆入质粒DNA中,经细菌培养后进行Sanger测序,根据测序结果经ClustalX2软件分析和IMTG/HLA数据库的BLAST比对即可完成HLA-B基因的高分辨率分型.利用建立的方法对7例临床样本进行了HLA-B基因分型,并且与第三方直接碱基序列分析基因分型技术(PCR-SBT)进行比对,结果完全一致.本方法无需专业分型软件,准确度高,成本低;采用通用引物进行等位基因的扩增和测序,无需传统方法中繁琐的引物设计和过程优化,实现了HLA-B基因的高分辨率分型.
%K 人类白细胞抗原-B基因
%K 克隆测序技术
%K Sanger测序
%K 高分辨率基因分型
%U http://210.14.121.5:8080/fxhx/CN/abstract/abstract13700.htm