%0 Journal Article
%T 基于竞争触发滚环扩增的荧光适配体传感器高灵敏检测凝血酶
%A 张松柏
%A 郑丽英
%A 胡霞
%A 沈广宇
%A 刘学文
%A 沈国励
%A 俞汝勤
%J 分析化学
%P 1688-1694
%D 2015
%R 10.11895/j.issn.0253-3820.150527
%X 利用目标蛋白、适体探针、挂锁探针和与适体探针匹配的互补序列之间的竞争反应,发展了一种基于滚环扩增的高灵敏荧光适配体传感器。在不含目标蛋白时,互补序列由于与适体探针杂交形成双链,因此不能与挂锁探针杂交以触发连接-滚环放大反应。相反,有目标蛋白存在时,由于目标蛋白与适体探针结合,使得互补序列被置换下来,从而可以与挂锁探针杂交。在DNA连接酶的作用下,挂锁探针被进一步环化并在Phi29DNA聚合酶的作用下发生滚环扩增反应。扩增产物含有许多能与分子信标检测探针环状部分杂交的重复序列,从而分子信标被打开产生荧光信号。对互补序列的长度及挂锁探针的浓度进行了考察。在优化的实验条件下,本传感系统可以实现对的凝血酶高灵敏检测,线性范围为0.067~32nmol/L,检出限为0.03nmol/L(约90amol目标分子)。通过设计不同的适体探针和相关核酸序列,本传感系统可以作为一种通用型方法用于其它目标物的分析。
%K 核酸适配体
%K 滚环扩增
%K 分子信标
%K 荧光
%K 凝血酶
%U http://210.14.121.5:8080/fxhx/CN/abstract/abstract14035.htm