%0 Journal Article %T miR-222在胃癌中的表达分析及其靶基因FOS的鉴定 %A 朱恩东 %A 李娜 %A 肖斌 %A 黎伯胜 %A 毛旭虎 %A 邹全明 %J 第三军医大学学报 %P 2477-2581 %D 2010 %X 目的分析miR-222在胃癌中的表达水平并鉴定miR-222的靶基因。方法选取第三军医大学新桥医院普外科10例患者的胃癌及远癌组织,匀浆法提取总RNA,用Real-timePCR法检测miR-222表达。利用miRNA靶基因预测数据库TargetScan,MICROCOSM及PicTar对miR-222的靶基因进行预测。化学合成包含有miR-222结合位点的靶基因3′非编码区(3′UTR)退火引物,插入荧光素酶报告载体pMIR-REPORT及绿色荧光蛋白(GFP)报告载体pMIR-GFP-REPORT,检测荧光素酶的活性变化及观察GFP表达量,并在蛋白水平用Westernblot检测miR-222对靶基因的抑制。结?果miR-222在70%(7/10)的胃癌组织样本中表达上调。生物信息学(TargetScan,MICROCOSM及PicTar3个miRNA靶基因预测数据库)分析可得在包括人类在内的不同物种中,FOS基因3′UTR区都有miR-222的保守结合种子序列。通过荧光素酶活性检测和GFP抑制试验可得miR-222在mRNA水平可以与FOS基因结合。Westernblot结果显示miR-222可以抑制c-fos蛋白表达。结论miR-222在胃癌样本中表达上调,证明FOS为miR-222的一个靶基因。 %K miR- %K FOS %K 胃癌 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201007141