%0 Journal Article
%T HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达及抗原性研究
%A 袁作为
%A 帅光泽
%A 张君
%A 胡接力
%A 郑建
%J 第三军医大学学报
%P 2281-2285
%D 2010
%X 目的构建HIV跨膜蛋白gp41和gp36原核表达载体，诱导表达HIV抗原，为HIV快速诊断和蛋白疫苗研究提供材料基础。方法用PCR方法对HIV-1包膜蛋白gp41和HIV-2包膜蛋白gp36基因序列进行全长、截短扩增，分别或以融合表达方式克隆入原核表达载体pQE30、pET32a(+)及pGST-MOLUC，重组质粒经异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导表达，并经Ni-NAT或谷胱甘肽-Sepharose-4B层析柱亲和纯化HIV跨膜糖蛋白抗原，对获得的纯化抗原进行Westernblot检测，利用HIV抗原制备ELISA检测试剂盒，并分析HIV临床样本。结果成功构建了HIV包膜蛋白的原核表达载体，利用亲和层析纯化得到了纯度较高的HIV包膜蛋白；Westernblot分析结果证实表达纯化的HIV跨膜蛋白gp41(aa.538～718)、gp36(aa.533～764)以及gp41-gp36均能和HIV阳性血清反应；ELISA试剂盒检测临床样本显示，特异性达95%以上，灵敏度达100%。结论获得了有生物学活性的HIV截短包膜蛋白，并可用于HIV快速检测试剂盒的研发。
%K HIV-包膜蛋白gp
%K HIV-包膜蛋白gp
%K 重组
%K 抗原性
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201006108