%0 Journal Article
%T 人锌转运体8强免疫原性片段的预测及原核表达鉴定
%A 吴？
%A 刘宝英
%A 徐 静
%A 姜友昭
%A 陈兵
%J 第三军医大学学报
%P 1162-1164
%D 2010
%X 目的筛选人锌转运体8（Zinctransporter8，ZnT8）中强免疫原性片段，并对其进行克隆表达及鉴定。方法采用生物信息学软件预测ZnT8结构特征，筛选出具有强免疫原性的N末端片段ZnT8（N），经PCR（PolymeraseChainReaction）技术扩增，构建表达质粒pET32a-ZnT8（N），转化入E.coliBL21(DE3)中，异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导目的蛋白的表达，并对表达产物进行SDS-PAGE分析及Westernblot鉴定。结果从ZnT8分子中筛选出具有140个氨基酸的肽段ZnT8（N），重组质粒pET32a-ZnT8（N）经酶切和测序鉴定证实构建成功。转入大肠杆菌进行表达，表达产物相对分子质量（Mr）约32000，与预期值相符，并经免疫印迹检测鉴定为阳性，融合蛋白的表达量约占菌体蛋白总量45%。？结论？筛选获得了人胰岛细胞来源的ZnT8强免疫原性片段，并在原核系统中成功表达。？
%K ZnT
%K 原核表达
%K 免疫原性
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201002046