%0 Journal Article %T 基于pJFH-1的HCV全基因组扩增方法的建立 %A 郭艳 %A 兰林 %A 何长龙 %A 洪国祜 %A 程玲 %A 毛青 %J 第三军医大学学报 %P 1144-1147 %D 2011 %X 目的基于pJFH-1建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方法。方法以pJFH-1为测试模板,通过优化PCR扩增中各个重要环节,包括引物的选择、甘油和/或DMSO最适浓度的筛选、循环条件的摸索等,建立能稳定扩增HCV全基因组的长链PCR方案。结果高Tm值(>65℃)的引物更有利于HCV全基因组的扩增;5%、10%甘油或5%DMSO可显著提高PCR扩增的特异性和扩增效率,且甘油的促进作用优于DMSO;双温法较三温法能获得更高产量的PCR产物。结论通过优化长链PCR反应体系及条件,成功实现HCV基因全长的扩增。 %K 长链PCR %K pJFH- %K HCV全基因组 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201103103