%0 Journal Article
%T 真核表达载体pEGFP-N2/AT2R的构建及其在原代血管平滑肌细胞的表达
%A 左玉梅
%A 王媛
%A 刘建平
%J 第三军医大学学报
%P 940-943
%D 2011
%X 目的体外构建携带血管紧张素Ⅱ2型受体(ANGⅡType2Receptor，AT2R)基因的增强型绿色荧光蛋白真核表达载体,并观察其在大鼠血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)中的表达。方法以pUHD-10.3/AT2R质粒为模板，PCR扩增AT2R基因的全长cDNA序列,再将其克隆入载体pEGFP-N2，构建其真核表达载体pEGFP-N2/AT2R。以基因转染技术，将AT2R导入原代VSMCs。倒置荧光显微镜观测转染后VSMCs生长变化及AT2R在其中的表达等情况。图像分析技术检测AT2R在VSMCs中的转染效率。Westernblot检测转染AT2R基因的VSMCs表达其编码蛋白。RT-PCR法对AT2R基因修饰的VSMCs进行鉴定。结果成功构建AT2R基因的真核表达载体pEGFP-N2/AT2R，该真核载体能携带AT2R基因转染并有效表达于VSMCs，其转染效率约40%，RT-PCR及Westernblot均可检测到AT2RmRNA及蛋白在血管平滑肌细胞中高表达。结论成功地将克隆到的AT2R基因克隆入pEGFP-N2载体中，并实现了AT2R基因在原代VSMCs的表达。
%K 血管紧张素Ⅱ型受体基因
%K 克隆
%K 原代血管平滑肌细胞
%K 绿色荧光蛋白
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201012006