%0 Journal Article
%T 含uPA裂解位点的人sTrail融合基因的构建及其原核蛋白表达与纯化
%A 梁宇佳
%A 缪殿南
%A 闫国和
%A 戴晓天
%A 熊玮
%J 第三军医大学学报
%P 789-792
%D 2011
%X 目的构建含尿激酶纤溶酶原激活剂（urokinaseplasminogenactivator，uPA）裂解位点的人可溶性凋亡诱导配体（solublerelatedapoptosisinducingligand,sTrail)基因的原核载体，表达并纯化其融合蛋白sTrail-uPA。方法RT-PCR法克隆sTrail基因后，经引物延伸法构建his-uPA-sTrail融合基因并亚克隆至原核表达载体pET-32a中，诱导其表达蛋白并将其纯化，肠肽酶（enterokinase，EK）切与再次纯化回收该蛋白，Westernblot检测其抗原性。结果表达载体经诱导成功获约38×103含载体表达标签（Trx）的融合蛋白，EK酶切该蛋白获约19.5×103的目的蛋白uPA-sTrail。检测表明，该目的蛋白具人Trail抗原性。结论成功克隆uPA-sTrail融合基因并构建至原核表达载体，并获约19.5×103的融合蛋白，且该蛋白具人Trail抗原性。
%K 克隆
%K 融合基因
%K 融合蛋白
%K 抗原性
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201012247