%0 Journal Article
%T 金黄色葡萄球菌N315T7噬菌体cDNA展示文库的构建
%A 于俊媛
%A 周莹冰
%A 张雯庆
%A 祁琳
%A 李萌
%A 姜北
%A 张骁鹏
%A 汪正清
%A 饶贤才
%A 黎庶
%A 胡晓梅
%J 第三军医大学学报
%P 1350-1353
%D 2014
%X 目的构建MRSAN315菌株的T7噬菌体cDNA展示文库，以筛选和鉴定影响N315ccr基因表达的调节因子。方法采用Tripure试剂提取N315总RNA，逆转录合成双链cDNA，经末端修平、接头连接、酶切后柱洗脱等处理后，连接T7Select10-3载体，体外包装扩增获得N315T7噬菌体cDNA展示文库；通过双层平板实验鉴定所建原始文库及扩增文库的库容；PCR鉴定文库插入片段质量。结果原始文库重组克隆数为1.335×106pfu，扩增文库的噬菌体滴度为3.26×1010pfu/mL。随机PCR扩增显示文库阳性重组率为100%，插入片段在300～1500bp之间。结论MRSAN315的T7噬菌体cDNA展示文库构建成功。
%K 噬菌体展示
%K cDNA文库
%K 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
%K N
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201311058