%0 Journal Article
%T 人气道上皮细胞感知冷刺激的受体机制
%A 李敏超
%A 何叶
%A Juliy M. Perelman
%A Victor P. Kolosov
%A 周向东
%J 第三军医大学学报
%P 2071-2076
%D 2014
%X 目的探讨温度感受器瞬时受体电位蛋白-8（transientreceptorpotentialmelastatin8，TRPM8）在人气道上皮细胞感受冷刺激过程中发挥的作用及其机制。方法用薄荷醇及冷空气（18℃）刺激人气道上皮16HBE细胞：①以TRPM8通道特异性拮抗剂BCTC、TRPM8shRNA为干预手段，动态观察在薄荷醇、冷刺激作用下细胞内Ca2+荧光强度变化来监测气道上皮细胞上TRPM8的功能；②以磷脂酰肌醇4，5-二磷酸（phosphatidylinositol4，5-bisphosphate，PIP2）荧光分子探针PLCδ1-PH-GFP转染细胞，通过动态观察各组细胞内PLCδ1-PH-GFP从细胞膜至细胞质的荧光转位变化来检测PIP2的动态变化来研究冷刺激作用下TRPM8的信号通路。结果①细胞内相对钙离子浓度变化：薄荷醇组处理4min后、冷刺激组处理6min后分别为（5.80±0.34）、（5.02±0.36），明显高于对照组（1.04±0.12）、（1.03±0.08）（P<0.05），1mmol/L薄荷醇组+BCTC组、1mmol/L薄荷醇组+转染TRPM8shRNA组最高值分别为（2.68±0.19）、（1.08±0.16），明显低于1mmol/L薄荷醇组，18℃+BCTC组、18℃+转染TRPM8shRNA组最高值分别为（1.77±0.22）、（1.02±0.18），明显低于18℃组（均P<0.05）；②PLCδ1-PH-GFP从细胞膜至细胞质的转位变化（Fm/Fc值）：1mmol/L薄荷醇组、冷刺激组最高值分别为（0.90±0.01）、（0.90±0.01），明显高于对照组最高值（1.01±0.02）（P<0.05），细胞处理200s时1mmol/L薄荷醇+BCTC15μmol/L组、1mmol/L薄荷醇组+转染TRPM8shRNA组分别为（0.86±0.03）、（？0.89±？0.02），明显低于1mmol/L薄荷醇组（0.36±0.06）（P<0.05），细胞处理220s时18℃+BCTC15μmol/L组、18℃+转染TRPM8shRNA组分别为（0.82±0.02）、（0.93±0.01），明显低于18℃组（0.40±0.06）（P<0.05）。结论TRPM8受体是人气道上皮细胞感受冷刺激的主要受体，并通过TRPM8→Ca2+→PLC→PIP2信号通路引起气道黏液高分泌等反应。
%K 气道上皮细胞
%K 冷刺激
%K 瞬时受体电位蛋白-
%K Ca+
%K PIP
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201403089