%0 Journal Article
%T 肺炎链球菌蛋白PotD的表达纯化及免疫活性分析
%A 闵迅
%A 黄健
%A 黄美容
%A 钟文
%A 董杰
%A 陈特
%A 张雪梅
%J 第三军医大学学报
%P 1660-1663
%D 2014
%X 目的研究PotD蛋白免疫保护活性，探讨其作为疫苗候选蛋白的可能性。方法构建、表达、纯化PotD蛋白，通过免疫BALB/c小鼠以制备多克隆抗体，评估其免疫原性，并进一步分析其对儿童的免疫保护效应；采用PCR技术扩增8株不同血清型S.pn中PotD基因后进行测序鉴定分析基因序列的保守性；再通过westernblot技术分析8株菌中PotD蛋白的表达水平，以评估PotD蛋白保守性；采用粘附抑制实验分析PotD蛋白的免疫保护活性。结果成功获得纯度大于95%的PotD目的蛋白，将其免疫小鼠后获得高效价抗体；在10岁以下儿童S.pn感染者及健康带菌者血清中均有抗PotD存在；对8株不同血清型S.pnPotD基因进行PCR扩增和测序发现8株细菌中该基因具有高度保守性；Westernblot技术分析证实，8株不同血清型S.pn均表达该蛋白；粘附抑制实验证实，重组PotD蛋白及其抗体均能够显著抑制S.pn对A549细胞的粘附作用。结论PotD蛋白制备方便，在我国流行S.pn血清型中有良好的保守性和免疫原性，能够显著抑制S.pn对宿主细胞的粘附，可能成为良好的蛋白疫苗靶点。
%K 肺炎链球菌
%K 谷氨酰胺tRNA合成酶
%K 保守性
%K 抗原性
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=201401203