%0 Journal Article %T 赖氨酸490突变对OATP-C分子底物转运能力的影响 %A 杨聪 %A 陈文生 %A 邓国宏 %A 汪荣泉 %A 肖天利 %J 第三军医大学学报 %P 1925-1928 %D 2007 %X 目的研究人肝脏特异的有机阴离子转运蛋白基因OATP-C蛋白分子膜外区保守的490位阳离子赖氨酸对其有机阴离子底物摄取能力的影响。方法从人肝脏mRNA中克隆OATP-C野生型基因全长cDNA序列,通过定点突变将高度保守的第490位赖氨酸残基突变为中性氨基酸-苏氨酸,构建其C端的GFP融合蛋白的真核表达载体,转染HEK293细胞,观察突变体的细胞膜定位能力和底物摄取功能的变化。结果OATP-C野生型及突变体均能定位表达于HEK293细胞质膜;[3H]硫酸盐雌酮底物摄取实验显示,突变体5min底物摄取量较野生型下降了38.66%,浓度依赖的[3H]硫酸盐雌酮底物摄取动力学分析表证明,突变体Km和Vmax分别明显增高和降低。结论OATP-C蛋白膜外区第490位赖氨酸是关键的功能氨基酸,是其重要的结构功能单位。 %K OATP-C %K 定点突变 %K 底物摄取 %K HEK细胞 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=070386