%0 Journal Article
%T 修饰GLP2分泌性表达载体的构建及促增殖活性测定的实验研究
%A 谭虎
%A 杨天德
%A 粟永萍
%A 艾国平
%A 黄岚
%A 陶军
%A 刘晓宏
%A 楼淑芬
%J 第三军医大学学报
%P 1650-1653
%D 2007
%X 目的对胰高血糖素样肽-2（glucagon-likepeptid-2，GLP-2）进行基因修饰，观察其促细胞增殖活性。方法通过RT-PCR方法获得含GLP2编码序列的高血糖素原cDNA片段；通过PCR重叠延伸技术得到GLP2信号肽及成熟肽的嵌合分子，并将编码GLP2成熟肽N-末端第二位丙氨酸的序列(GCT)突变为编码甘氨酸的序列(GGT)；将其插入真核表达质粒pVITRO3，转染至肠上皮细胞（Caco-2），观察其对细胞增殖活性的影响。结果克隆的修饰GLP2基因与国外报道的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列完全一致，并成功拼接GLP2的信号肽及成熟肽；且加入pVITRO3-GLP2-Caco-2培养上清的细胞生长明显快于对照组。结论PCR重叠延伸技术适用于分泌性载体构建。构建的修饰GLP2表达系统所表达的蛋白具有促进肠上皮细胞增殖的作用。
%K 胰高血糖素样肽-
%K 基因克隆
%K PCR重叠延伸技术
%K 肠上皮
%K 细胞增殖
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=070208