%0 Journal Article
%T 抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段抗体dsFvVL链的构建、表达和鉴定
%A 葛晓冬
%A 邹佳
%A 杨艳丽
%A 刘友生
%J 第三军医大学学报
%P 1364-1367
%D 2007
%X 目的将抗人脂多糖结合蛋白氨基端片段（NH-LBP）抗体的FvL链引入半胱氨酸（Cys），并表达、纯化。方法应用mega-primerPCR方法，在抗NH-LBP单克隆Fab抗体的轻链基因骨架区中引入编码Cys的基因序列，将目的序列放入载体pET-28a(+)，于工程菌BL21star(DE3)中表达及TALON柱芯亲合纯化，通过ELISA法初步鉴定其与NH-LBP的结合力。结果dsFvVL链的Thr21替换为Cys，扩增出基因片段长约为650bp，经BL21star（DE3）菌表达出相对分子质量约为28×103的目的蛋白，与NH-LBP具有一定的结合力。结论抗体轻链中成功引入了Cys。
%K 脂多糖结合蛋白氨基端片段
%K 二硫键稳定性Fv抗体
%K 半胱氨酸
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=061022