%0 Journal Article
%T RNA干扰Neuropilins-2基因真核表达载体的构建及其鉴定
%A 周琪
%A 梁后杰
%A 阎晓初
%A 彭秋平
%A 周进明
%A 吴峰
%A 钟大平
%A 边志衡
%J 第三军医大学学报
%P 691-694
%D 2007
%X 目的构建Neuropilins-2(NRP2)基因RNA干扰(RNAi)的真核细胞表达载体。方法以NRP2为靶基因，以pGenSil-l质粒为载体，设计构件重组体，根据GenBank数据库提供的NRP2基因核苷酸序列,按照Tuschl设计原则,选择设计两条带发夹结构的核苷酸序列，克隆到空载体pGenSil-l中，转化DH5α菌株，提取质粒，进行限制性内切酶酶切鉴定和测序分析。重组pGenSil-NRP2载体转染LOVO细胞48h，收获细胞，采用Westernblotting检测其NRP2蛋白表达。结果经酶切鉴定筛选出的重组体测序结果与目的序列完全一致，重组载体构建成功。重组体pGenSil-NRP2转染LOVO细胞48h后NRP2蛋白表达显著降低。结论利用RNAi技术可成功构建抑制NRP2表达的小干扰RNA重组体。
%K NRP
%K RNA干扰
%K 真核表达载体
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=061170