%0 Journal Article
%T 成纤维细胞生长因子受体3腺病毒载体的包装与鉴定
%A 刘志君
%A 陈林
%J 第三军医大学学报
%P 561-564
%D 2007
%X 目的构建成纤维细胞生长因子受体3(fibroblastgrowthfactorreceptors3,FGFR3)腺病毒载体，并进行鉴定、包装及表达检测。方法将小鼠FGFR3cDNA亚克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV上，通过电击转化使其在BJ5183细菌中与AdEasy-1同源重组，通过酶切及测序筛选阳性重组子。以脂质体介导法转染HEK293细胞进行包装、扩增并测定其滴度；并用RT-PCR及Westernblot检测FGFR3在HT29细胞中的表达。结果经限制性内切酶检测、测序鉴定和细胞转染后GFP的表达等证实成功地构建了携带FGFR3cDNA的重组腺病毒载体并制备出有感染能力的高滴度重组腺病毒。将构建的腺病毒重组子转染HT29细胞，RT-PCR及Westernblot均检测到FGFR3的表达。结论成功地构建了含有FGFR3cDNA的重组腺病毒载体并在HT29中表达了小鼠FGFR3分子，为进一步研究FGFR3的功能及其在骨折愈合中的作用提供有效的基因转移载体。
%K FGFR
%K 腺病毒
%K 转染
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=060842