%0 Journal Article %T 质粒表达型siRNA对人近端肾小管上皮细胞cubilin表达的抑制作用 %A 林静 %A 何娅妮 %A 杨聚荣 %A 李新伦 %A 梁海君 %A 吴劲松 %A 李开龙 %A 丁涵露 %A 张建国 %J 第三军医大学学报 %P 471-474 %D 2007 %X 目的观察cubilinsiRNA真核表达载体对人近端肾小管上皮细胞(humanrenalproximaltubularepithelialcellline,HKC)cubilin基因的特异性抑制作用。方法针对人cubilin基因设计并构建siRNA真核表达载体pSUPEREGFP-C1和pSUPEREGFP-C2,转染HKC,经荧光定量PCR(FQ-PCR)检测cubilinmRNA的表达、不同浓度的人血清白蛋白(HSA)刺激正常HKC及转染重组质粒的HKC24h后cubilinmRNA的表达,并通过激光共聚焦扫描荧光显微镜观察HKC对白蛋白摄取情况的变化。结果FQ-PCR显示HSA刺激正常HKC后cubilinmRNA表达具有剂量依赖性。与正常对照组相比,两个重组质粒均可部分抑制HKCcubilin表达,抑制效率分别为66%和37%,HSA刺激转染pSUPEREGFP-C1、pSUPEREGFP-C2的HKC后cubiinmRNA水平较正常对照组比较分别下降50%、34%,转染了重组质粒的HKC对白蛋白的摄取明显减少。结论成功地构建了针对人cubilin基因的RNA干扰真核表达载体,表达型siRNA可抑制肾小管上皮细胞cubilin基因的表达及对白蛋白的摄取。 %K cubilin %K RNA干扰 %K siRNA %K 人近端肾小管上皮细胞 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=061214