%0 Journal Article %T 人MCHR2真核表达载体的构建及稳定转染CHO细胞系的建立 %A 袁成福 %A 杨俊霞 %A 魏丽丽 %A 石华 %A 陈济 %A 宋方洲 %J 第三军医大学学报 %P 32-35 %D 2007 %X 目的构建人MCHR2真核表达载体,转染CHO细胞,建立稳定转染的CHO细胞系。方法采用PCR方法,以人胎脑cDNA文库为模板扩增人MCHR2基因的全长cDNA编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pcDNA3.1(+),经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染CHO细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的CHO细胞系,用RT-PCR、Westernblot及免疫荧光法检测MCHR2的表达。结果成功构建了pcDNA3.1(+)/MCHR2真核表达载体,并建立了稳定转染的CHO细胞系,成功地表达目的基因。结论真核表达载体成功构建和稳定转染CHO细胞系的建立为进一步研究MCHR2的功能奠定良好的实验基础。 %K MCHR %K 真核表达载体 %K 稳定转染的CHO细胞系 %K 基因表达 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=061216