%0 Journal Article %T 核因子NF-κBp65亚基TAD的克隆及表达 %A 侯春丽 %A 应大君 %A 魏勇 %J 第三军医大学学报 %P 21-23 %D 2007 %X 目的获得NF-κBp65亚基转录激活区域(transcriptionactivationdomain,TAD),构建真核表达载体并在内皮细胞中检测其表达。方法培养人脐静脉内皮细胞,提取总RNA,经RT-PCR得到p65TAD基因片段,测序正确后插入带有绿色荧光蛋白的真核表达载体pEGFP-N1,构建表达载体pEGFP-N1-p65TAD,然后转染内皮细胞,荧光显微镜下观察表达情况,同时用Westernblot分析蛋白的表达。结果有效地扩增了p65TAD783bp的目的基因片段。酶切结果表明所构建的含p65TAD基因的质粒与设计相同。p65TAD在脐静脉内皮细胞中得到了高效的表达。结论成功地构建了p65TAD的真核表达载体并实现了在内皮细胞中的高效表达。 %K 核转录因子NF-κB %K p亚基转录激活区域 %K 克隆 %K 表达 %U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=060718