%0 Journal Article
%T 小鼠精子蛋白Sp17的克隆、表达及其免疫原性研究
%A 张巧玉
%A 梁志清
%A 李玉艳
%A 李晋涛
%A 史常旭
%J 第三军医大学学报
%P 2281-2284
%D 2008
%X 目的获得鼠精子蛋白Sp17基因，构建重组表达载体并实现其在大肠杆菌中的高效表达，为制备免疫性避孕疫苗奠定基础。方法提取BALB/c小鼠睾丸组织总RNA，通过RT-PCR扩增Sp17基因全长cDNA序列，并将其克隆至pMD18-T质粒载体中，再经HindⅢ/XhoⅠ双酶切将Sp17基因片段亚克隆至原核表达载体pET-28a（+）中，转化大肠杆菌BL21(DE3)，异丙基-β-硫代半乳糖苷（IPTG）进行诱导表达，采用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、Westernblot对表达产物进行初步鉴定，并检测重组蛋白Sp17免疫小鼠后血清特异抗体滴度。结果获得了小鼠Sp17的全长cDNA，成功构建了重组原核表达载体pET/Sp17，在IPTG的诱导下实现了目的蛋白在大肠杆菌中的高效表达，免疫后小鼠血清中检测到特异性抗体。结论小鼠精子蛋白Sp17基因序列已被克隆至原核表达载体pET-28a（+）中，并在大肠杆菌BL21(DE3)中获得高效、正确的表达，重组蛋白Sp17能够诱导产生特异性免疫反应，具有一定程度的免疫原性。
%K 小鼠
%K 精子蛋白
%K 克隆
%K 原核表达
%U http://aammt.tmmu.edu.cn/oa/darticle.aspx?type=view&id=200803009